مروری بر انواع روش‌های Real-time PCR و بهینه‌سازی آن
Authors
Abstract:
روش Real-time PCR در سال‌های اخیر به عنوان روشی انتخابی جهت تشخیص بسیاری از بیماری‌های عفونی در آزمایشگاه ها مورد استفاده قرار گرفته است. با استفاده از این فن آوری، واکنش زنجیره پلیمراز توسط مولکول‌های گزارش گر فلورسنت انجام و از این طریق، تولید فرآورده‌های تکثیری طی هر چرخه واکنش PCR گزارش می‌شود. بدین ترتیب مجموعه‌ای از خصوصیات از جمله؛ حساسیت و اختصاصیت بالا، داده‌های قابل اعتماد و خطر پایین آلودگی، فن آوری Real-time PCR را به جایگزینی مناسب برای PCR معمولی تبدیل کرده است. این روش اغلب در تعیین کمیت سطوح بیان ژن نیز مورد استفاده قرار می‌گیرد. از آنجایی که تمامی مراحل Real-time PCR در داخل یک لوله دربسته انجام می‌شود، خطر ایجاد آلودگی در آن در مقایسه با PCR معمولی بسیار کاهش یافته و در نتیجه از حصول نتایج مثبت کاذب جلوگیری می‌شود. هدف از این مقاله، مرور کلی در مورد انواع مختلف روش Real-time PCR، مزایا و کاربردهای آن می‌باشد.
similar resources
مروری جامع و ضروری بر PCR، انواع و کاربردهای آن
اختراع واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) نقطه عطفی در تاریخ علوم زیستی و پزشکی است. کاربرد PCR نه‌تنها بطور کامل درزمینه تحقیقات ژنتیک مولکولی بخصوص در بیوتکنولوژی جانوری و گیاهی انقلابی ایجاد کرده است بلکه این تکنیک، ارتباط و کارایی مبتکرانه خود را در زمینه‌های دیگر علم پزشکی قانونی، سیستماتیک مولکولی، اپیدمیولوژی مولکولی، باستان‌شناسی، مردم‌شناسی، ژنتیک تکاملی و غیره نیز ثابت کرده است. PCR سنتی...
full textReal-Time PCR Platforms
Real-time PCR continues to have a major impact across many disciplines of the biological sciences and this has been a driver to develop and improve existing instruments. From the first two commercial platforms introduced in the mid 1990s, there is now a choice in excess of a dozen instruments, which continues to increase. Advances include faster thermocycling times, higher throughput, flexibili...
full textPerforming Real-Time PCR
Optimisation of the reagents used to perform PCR is critical for reliable and reproducible results. As with any PCR initial time spent on optimisation of a real-time assay will be benefi cial in the long run. Specifi city, sensitivity, effi ciency and reproducibility are the important criteria to consider when optimising an assay and these can be altered by changes in the primer concentration, ...
full textReal-time PCR Statistics
Real-time PCR is a powerful tool to compare relative transcriptional abundance, and has been broadly applied in biomedical sciences. However, methods for rigorous statistical analyses have lagged behind applications. Confidence interval and statistical significance considerations are not explicit in many of the current data analysis approaches. Based on the standard curve method and other usefu...
full textReal-Time PCR
The real-time polymerase chain reaction (real-time PCR) is a recent modification to PCR (UNIT 10.2) that is rapidly changing the nature of how biomedical science research is conducted. It was first introduced in 1992 by Higuchi and coworkers and has seen a rapid increase in its use since (Higuchi et al., 1992, 1993). Real-time PCR allows precise quantification of specific nucleic acids in a com...
full textQuantitative Real-Time PCR
Unlike classical end-point analysis PCR, real-time PCR provides the data required for quantification of the target nucleic acid. The results can be expressed in absolute terms by reference to external quantified standards or in relative terms compared to another target sequence present within the sample. Absolute quantification requires that the efficiency of the amplification reaction is the s...
full textMy Resources
Journal title
volume 21 issue 3
pages 90- 76
publication date 2017-08
By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.
No Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023